近日，南京農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院汪良駒教授團(tuán)隊(duì)在綜合性TOP期刊Journal of Advanced Research（Q1，IF:11.4）上發(fā)表了題為“5-Aminolevulinic acid improves strawberry salt tolerance through a NO–H2O2 signaling circuit regulated by FaWRKY70 and FaWRKY40”的研究論文，揭示了兩個(gè)新的轉(zhuǎn)錄因子FaWRKY70和FaWRKY40各自轉(zhuǎn)錄調(diào)控NO和H2O2之間復(fù)雜傳導(dǎo)關(guān)系，以及進(jìn)一步調(diào)控Na+的外排、區(qū)隔化分布以及木質(zhì)部截留的效應(yīng)，為ALA在植物耐鹽栽培上應(yīng)用提供了理論依據(jù)，為耐鹽植物育種提供了基因資源。

01.研究背景

    鹽脅迫嚴(yán)重抑制植物生長(zhǎng)發(fā)育。地球鹽漬土覆蓋面積超過(guò)8.33億公頃，占地球陸地表面積8.7%。中國(guó)近1億公頃的土地屬于鹽漬土。預(yù)計(jì)到2050年，超過(guò)50%的可耕地將受到土壤鹽分影響。草莓（Fragaria × ananassa Duch.）是一種淺根系作物，對(duì)鹽分非常敏感。研究提高草莓耐鹽性方法并探索其潛在的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制具有重要科學(xué)價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義。前文提出，5-氨基乙酰丙酸（ALA）能夠誘導(dǎo)鹽脅迫下草莓根系信號(hào)物質(zhì)一氧化氮（NO）和過(guò)氧化氫（H2O2）積累，后者誘導(dǎo)鈉離子（Na+）截留于根系，從而減少向上運(yùn)輸，減少葉片積累，達(dá)到增強(qiáng)植物耐鹽性的目的。然而，其中的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制未被揭曉。

 02研究?jī)?nèi)容

信號(hào)分子NO和H2O2介導(dǎo)ALA誘導(dǎo)草莓耐鹽性提高過(guò)程不是原先報(bào)道的簡(jiǎn)單的上下游關(guān)系，而是呈環(huán)狀，起到交互調(diào)控作用（圖1）。ALA可以誘導(dǎo)FaNR1和FaRbohD轉(zhuǎn)錄，促進(jìn)根系NO和H2O2積累。然后，NO上調(diào)FaHKT1基因表達(dá)，將Na+離子截留在木質(zhì)部薄壁細(xì)胞中，降低汁液中Na+含量；而H2O2上調(diào)FaSOS1和FaNHX1基因表達(dá)，它們分別將Na+排到細(xì)胞外以降低植物體內(nèi)Na+，或區(qū)隔化至液泡中，既減少離子毒害，又作為無(wú)機(jī)滲透溶質(zhì)，起到滲透調(diào)節(jié)作用。

圖1 NO和H2O2交互調(diào)節(jié)，介導(dǎo)ALA誘導(dǎo)的草莓耐鹽性

   利用轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)，作者挖掘一個(gè)WRKY類轉(zhuǎn)錄因子FaWRKY40。該基因在鹽脅迫下表達(dá)受到ALA誘導(dǎo)。將FaWRKY40在大葉煙草（Nicotiana tabacum）和森林草莓（Fragaria vesca）中過(guò)表達(dá)（圖2），則植株耐鹽性顯著增強(qiáng)；若干擾表達(dá)，則森林草莓耐鹽性顯著降低；若用ALA處理，則進(jìn)一步增強(qiáng)轉(zhuǎn)基因草莓耐鹽性。分析顯示，F(xiàn)aWRKY40通過(guò)結(jié)合并激活FaRbohD、FaSOS1和FaNHX1啟動(dòng)子活性參與調(diào)節(jié)根系中H2O2產(chǎn)生、Na+外排和液泡區(qū)隔的調(diào)節(jié)。

圖2 FaWRKY40促進(jìn)森林草莓耐鹽性提高

作者還找到一個(gè)負(fù)調(diào)控因子FaWRKY70，該基因表達(dá)被鹽脅迫誘導(dǎo)。作為轉(zhuǎn)錄因子，F(xiàn)aWRKY70能結(jié)合并抑制FaWRKY40、FaNR1和FaHKT1啟動(dòng)子活性（圖3），消除根系NO積累和Na+截留效應(yīng)。過(guò)表達(dá)FaWRKY70將降低森林草莓耐鹽性，而在ALA處理后得到顯著緩解。

圖3 FaWRKY70結(jié)合并抑制FaNR1和FaHKT1啟動(dòng)子活性

基于上述結(jié)果，作者提出ALA誘導(dǎo)草莓根系信號(hào)通路轉(zhuǎn)錄調(diào)控以及耐鹽性提高的機(jī)制模型（圖4）。當(dāng)草莓單純受到鹽脅迫時(shí)，根系FaWRKY70表達(dá)上調(diào)；后者直接與FaNR1、FaHKT1和FaWRKY40的啟動(dòng)子結(jié)合，下調(diào)它們的表達(dá)。NO信號(hào)減弱，由FaWRKY40調(diào)節(jié)的離子截留機(jī)制被抑制，根系吸收的Na+運(yùn)往地上部，離子毒害引起葉片生理紊亂。如果預(yù)先用外源ALA處理，則FaWRYK70表達(dá)受抑，FaWRKY40、FaNR1和FaHKT1表達(dá)活性上升。然后，FaNR1導(dǎo)致NO生成，上調(diào)FaHKT1表達(dá)，木質(zhì)部汁液中Na+被截留在薄壁細(xì)胞。FaWRKY40上調(diào)后，可以激活FaRbohD、FaSOS1和FaNHX1啟動(dòng)子，激活它們轉(zhuǎn)錄和基因表達(dá)。該模型包括轉(zhuǎn)錄調(diào)控、信號(hào)分子以及Na+外排、液泡區(qū)隔化分布和木質(zhì)部汁液再分布。它可以順暢解釋ALA改善草莓耐鹽性過(guò)程。

03.作者及團(tuán)隊(duì)介紹

論文第一作者為南京農(nóng)業(yè)大學(xué)在讀博士生楊豪，南京農(nóng)業(yè)大學(xué)汪良駒教授和仲巖副教授為通訊作者。